Bücher von Zaman Shazadi Butt

A xilose/glucose isomerase é uma enzima industrial importante, que tem sido utilizada para a conversão de glucose em frutose há décadas. Esta investigação centra-se na produção de glucose isomerase a partir de Escherichia coli DH5¿. Os estudos de otimização da fermentação mostraram que uma maior quantidade de extrato de levedura e de triptona aumentava o crescimento celular e que a temperatura óptima para o crescimento era de 37°C. A purificação parcial da xilose isomerase foi efectuada utilizando tratamento térmico e precipitação com sulfato de amónio. 80% do valor de corte do sal produziu uma atividade máxima para o concentrado enzimático. A xilose isomerase apresentou actividades máximas à temperatura de 75 °C e pH 8. A atividade enzimática em condições óptimas foi de 5,0 U/min/ml para E. coli DH5¿. A adição de iões de cobalto e xilose aumentou a atividade de 10 a 20 vezes. A atividade específica para E. coli DH5¿ foi de 60,5 nmol/min/mg de proteína. Apenas 8% do xarope de D-frutose máximo foi produzido utilizando 100 mM de D-glucose como substrato após 14 dias de incubação. Deste modo, a E. coli DH5¿ não é a melhor candidata para a produção de xarope de frutose elevado.

La xylose/glucose isomérase est une enzyme industrielle importante, utilisée depuis des décennies pour la conversion du glucose en fructose. Cette recherche se concentre sur la production de glucose isomérase à partir d'Escherichia coli DH5¿. Les études d'optimisation de la fermentation ont montré qu'une plus grande quantité d'extrait de levure et de tryptone augmentait la croissance cellulaire et que la température optimale de croissance était de 37°C. La purification partielle de la xylose isomérase a été réalisée par traitement thermique et précipitation au sulfate d'ammonium. Une activité maximale du concentré enzymatique a été obtenue à 80 % de la valeur de coupure du sel. La xylose isomérase a montré des activités maximales à une température de 75 °C et à un pH de 8. L'activité enzymatique dans des conditions optimales était de 5,0 U/min/ml pour E. coli DH5¿. L'ajout d'ions cobalt et de xylose a augmenté l'activité de 10 à 20 fois. L'activité spécifique pour E. coli DH5¿ était de 60,5 nmol/min/mg de protéine. Seulement 8% du sirop de D-fructose maximum a été produit en utilisant 100mM de D-glucose comme substrat après 14 jours d'incubation. Par conséquent, E. coli DH5¿ n'est pas un meilleur candidat pour la production de sirop à haute teneur en fructose.

La xilosio/glucosio isomerasi è un importante enzima industriale, utilizzato da decenni per la conversione del glucosio in fruttosio. Questa ricerca si concentra sulla produzione di isomerasi del glucosio da Escherichia coli DH5¿. Gli studi di ottimizzazione della fermentazione hanno mostrato che una maggiore quantità di estratto di lievito e di triptone ha aumentato la crescita cellulare e la temperatura ottimale per la crescita è stata di 37°C. La purificazione parziale della xilosio isomerasi è stata effettuata mediante trattamento termico e precipitazione con solfato di ammonio. L'80% del valore di cut off del sale ha prodotto la massima attività del concentrato enzimatico. La xilosio isomerasi ha mostrato la massima attività a 75 °C e a pH 8. L'attività enzimatica in condizioni ottimali è stata di 5,0 U/min/ml per E. coli DH5¿. L'aggiunta di ioni cobalto e xilosio ha aumentato l'attività di 10-20 volte. L'attività specifica per E. coli DH5¿ era di 60,5 nmol/min/mg di proteina. Solo l'8% del massimo sciroppo di D-fruttosio è stato prodotto utilizzando 100mM di D-glucosio come substrato dopo 14 giorni di incubazione. Pertanto, E. coli DH5¿ non è un candidato migliore per la produzione di sciroppo di fruttosio.

La xilosa/glucosa isomerasa es una importante enzima industrial que se utiliza desde hace décadas para la conversión de glucosa en fructosa. Esta investigación se centra en la producción de glucosa isomerasa a partir de Escherichia coli DH5¿. Los estudios de optimización de la fermentación mostraron que una mayor cantidad de extracto de levadura y triptona aumentaba el crecimiento celular y que la temperatura óptima para el crecimiento era de 37ºC. La purificación parcial de la xilosa isomerasa se llevó a cabo mediante tratamiento térmico y precipitación con sulfato amónico. El 80% del valor de corte de la sal produjo la máxima actividad del concentrado enzimático. La xilosa isomerasa mostró una actividad máxima a 75 °C de temperatura y pH 8. La actividad enzimática en condiciones óptimas fue de 5,0 U/min/ml para E. coli DH5¿. La adición de iones de cobalto y xilosa aumentó la actividad entre 10 y 20 veces. La actividad específica para E. coli DH5¿ fue de 60,5 nmol/min/mg de proteína. Sólo se produjo el 8% del jarabe de D-fructosa máximo utilizando 100mM de D-glucosa como sustrato tras 14 días de incubación. Por lo tanto, E. coli DH5¿ no es un mejor candidato para la producción de jarabe de alta fructosa.

Xylose/Glucose-Isomerase ist ein wichtiges industrielles Enzym, das seit Jahrzehnten für die Umwandlung von Glucose in Fructose verwendet wird. Diese Forschung konzentriert sich auf die Produktion von Glukose-Isomerase aus Escherichia coli DH5¿. Studien zur Optimierung der Fermentation zeigten, dass eine höhere Menge an Hefeextrakt und Trypton das Zellwachstum steigerte und die optimale Temperatur für das Wachstum 37°C betrug. Die teilweise Reinigung der Xylose-Isomerase erfolgte durch Wärmebehandlung und Ammoniumsulfat-Fällung. Bei 80 % des Salz-Cut-off-Wertes wurde die maximale Aktivität des Enzymkonzentrats erreicht. Die Xylose-Isomerase zeigte maximale Aktivitäten bei 75 °C und pH 8. Die Enzymaktivität bei optimalen Bedingungen betrug 5,0 U/min/ml für E. coli DH5¿. Die Zugabe von Kobaltionen und Xylose erhöhte die Aktivität um das 10-20fache. Die spezifische Aktivität für E. coli DH5¿ betrug 60,5 nmol/min/mg Protein. Bei Verwendung von 100 mM D-Glucose als Substrat wurden nach 14 Tagen Inkubation nur 8 % des maximalen D-Fructosesirups produziert. Damit ist E. coli DH5¿ kein besserer Kandidat für die Produktion von High Fructose Syrup.

Xylose/Glucose isomerase is an important industrial enzyme, which is being used for the conversion of glucose into fructose for decades. This research focuses on the production of glucose isomerase from Escherichia coli DH5¿. Fermentation optimization studies showed that higher amount of yeast extract and tryptone increased the cell growth and the optimum temperature for growth was 37°C. Partial purification of xylose isomerase was carried out using heat treatment and ammonium sulphate precipitation. 80% of the salt cut off value produced maximum activity for the enzyme concentrate. Xylose isomerase showed maximal activities at 75 °C temperature and pH 8. Enzyme activity at optimum conditions was 5.0 U/min/ml for E. coli DH5¿. Addition of cobalt ions and xylose enhanced the activity from 10-20 folds. The specific activity for E. coli DH5¿ was 60.5 nmol/min/mg of protein. Only 8% of the maximum D-fructose syrup was produced using 100mM of D-glucose as substrate after 14 days of incubation. Thereby, E. coli DH5¿ is not a better candidate for the production of High Fructose Syrup.