Gli effetti tripanocidi degli anticorpi contro la tubulina ricombinante T.brucei

T. b. i geni brucei alfa e beta tubulina sono stati espressi in E. coli utilizzando il plasmide di espressione pTrP2 e l'acido 3-¿-indolacrilico come induttore. Le tubuline espresse sono state analizzate mediante SDS-PAGE e confermate mediante Western blotting, in cui avevano una massa molecolare apparente identica di 50kDa. Le tubuline espresse sono state sciolte individualmente in Urea 8M e diluite 20 volte, dopodiché sono state concentrate e dializzate ampiamente contro il tampone MES. Dopo la dialisi, la resa media sia per l'alfa che per la beta tubulina è stata di 0,7 g per litro di coltura. Anticorpi policlonali sono stati prodotti in ciascuno dei 56 conigli immunizzati con tre dosi di tubuline concentrate a 150 ¿g o 450 ¿g per immunizzazione per animale. L'effetto di questi anticorpi su T. b. la crescita dei brucei è stata studiata mediante coltura di T. b. brucei si forma il flusso sanguigno fino al 25% degli antisieri di coniglio. Gli antisieri degli altri conigli non hanno inibito T. b. brucei crescita nella cultura. Questi risultati mostrano che gli anticorpi contro il tripanosoma tubulina espresso dai batteri possono non essere citotossici per T. b. brucei.